一、產品簡介
ACK Lysis Buffer（氯化銨型紅細胞裂解液），選擇性裂解無核紅細胞，保留白細胞、免疫細胞等有核細胞活性，常用于人 / 小鼠外周血、脾臟單細胞懸液去紅，適配流式、原代細胞分離、核酸提取等實驗。
配方（1×）：NH?Cl、KHCO?、EDTA，pH7.2~7.4；原理：氯化銨低滲滲透裂解紅細胞，有核細胞耐受短時處理 ?? 僅適用于哺乳類無核紅細胞；鳥類、魚、兩棲類有核紅細胞無法用 ACK 裂解
二、試劑與耗材準備
?ACK Lysis Buffer（區分：1× 即用型 / 10× 濃縮型，濃縮液需無菌純水稀釋至 1× 再使用）
?抗凝全血 / 組織單細胞懸液、預冷 PBS/HBSS/ 無血清培養基
?低溫離心機、15mL/50mL 離心管、移液槍、冰盒；細胞培養實驗需超凈臺無菌操作
三、標準操作方案（人外周血）
1.加裂解液：取新鮮抗凝全血，加入3~10 倍體積 1×ACK 裂解液（常規推薦 1:5；紅細胞富集樣本可用 1:10），輕柔顛倒 / 吹打混勻，嚴禁劇烈渦旋損傷白細胞
2.孵育裂解：室溫或冰上孵育 3–10 min
?小鼠血：3–5 min 即可
?人外周血：5–10 min，嚴禁超過 15 min，過長會損傷目標有核細胞；期間可輕混勻 1~2 次，液體由渾濁轉為透亮提示紅細胞破裂
3.終止 + 收集細胞：裂解完成后，補加 PBS/HBSS 稀釋終止；4℃，400–500 g，離心 5 min，緩慢吸棄紅色上清（不要觸碰細胞沉淀）
4.洗滌去除殘留 ACK：沉淀加入預冷 PBS 重懸，400–500 g 離心 5 min，棄上清；洗滌 1~2 次，減少氯化銨殘留干擾后續實驗
5.二次裂解（可選）：沉淀仍明顯發紅，可重復裂解步驟一次；微量殘留紅細胞多數不影響流式、核酸實驗
6.重懸待用：按實驗需求用培養基、PBS 或裂解液重懸細胞沉淀，進入計數、流式、RNA 提取等下游實驗
四、組織樣本（脾臟 / 淋巴結單細胞懸液）簡化流程
1.組織研磨過篩制備單細胞懸液，離心收細胞沉淀，棄上清
2.加入 3~5 倍體積 ACK 裂解液，冰上 3–5 min
3.PBS 終止，400–500 g 4℃離心 5 min，PBS 洗滌 1 次即可
